Výroční zasedání Americké asociace pro výzkum rakoviny (AACR) se konalo 17.–22. dubna v San Diegu. Letošní téma „Precision, Partnership, Purpose: Advancing Cancer Science to Save Lives Globally“ odráželo mimořádné úspěchy ve výzkumu rakoviny i jejich očekávaný dopad na pacienty po celém světě. Své poznatky představilo také několik výzkumných skupin NÚVR.
Molekulární sekvenování difuzních gliomů pomocí tekuté biopsie:
Vědci z výzkumných skupin olomouckého uzlu NÚVR ve své studii hodnotili proveditelnost molekulárního sekvenování difuzních gliomů prostřednictvím analýzy cirkulujících nádorových buněk (CTC) a cirkulující nádorové DNA (ctDNA) v periferní krvi odebrané před operací. ctDNA byla analyzována na přítomnost mutace IDH1 R132H. CTC byly detekovány u 29,1 % vzorků získaných při první operaci a u 54,5 % vzorků od pacientů s rekurentním onemocněním. V podskupině 67 pacientů s glioblastomem typu IDH-wildtype nebyl status CTC spojen s celkovým přežitím. Analýza z plazmy identifikovala mutaci IDH1 R132H u 14 % pacientů, včetně několika případů s negativním výsledkem testování při znalosti molekulárního profilu nádoru. Tato zjištění ukazují, že u difuzních gliomů lze detekovat jak CTC, tak ctDNA, a že tyto přístupy mohou doplňovat molekulární diagnostiku z tkáně. Záchyt mutace IDH1 R132H z plazmy navzdory negativnímu výsledku při znalosti molekulárního profilu může odrážet intratumorovou heterogenitu, biologickou kompartmentalizaci nebo limity odběru vzorku. Nábor pacientů i sběr dat nadále pokračují. (Abstrakt 1070. DOI: 10.1158/1538-7445.AM2026-1070)
Látky modulující autofagii a jejich mimocílová aktivita
Autofagie pomáhá mnoha nádorům přežívat stres, metabolickou zátěž i protinádorovou léčbu, a představuje tak relevantní terapeutický cíl. V další studii prezentované výzkumnými skupinami olomouckého uzlu NÚVR byl použit test Cell Painting k identifikaci sloučenin modulujících autofagii. Morfologické profilování jasně odlišilo inhibitory od aktivátorů. Inhibitory vykazovaly znaky odpovídající narušenému autofagickému toku, včetně fragmentace Golgiho aparátu, otoku mitochondrií a expanze endoplazmatického retikula. Pozoruhodné bylo, že molekula MCOPPB, ačkoli je známa jako agonista receptoru NOP, se seskupovala s inhibitory autofagie. Toto neočekávané chování MCOPPB ukazuje na dosud nerozpoznaný mechanismus a zdůrazňuje význam kombinace morfologického profilování s validací pomocí specifických markerů při hledání nových modulátorů autofagie s potenciálním onkologickým významem. (Abstrakt 6403. DOI: 10.1158/1538-7445.AM2026-6403)
Mechanismus cuproptózy nezávislé na mitochondriích
A do třetice prezentace práce výzkumných skupin z olomouckého uzlu NÚVR. Měď je esenciální stopový prvek, který funguje jako kofaktor řady metabolických a detoxikačních enzymů. Ve zvýšeném množství však vykazuje v nádorových buňkách výraznou cytotoxicitu a může indukovat nedávno charakterizovanou formu regulované buněčné smrti označovanou jako cuproptóza. V současnosti se předpokládá, že cuproptóza závisí na mitochondriální aktivitě.
Autoři hodnotili několik ionoforů mědi v jejich komplexované formě s mědí, včetně bis(diethyldithiokarbamátu) (CuET), pyrithionu, NSC319726 a 8-hydroxychinolinu, aby posoudili jejich schopnost indukovat cuproptózu. Překvapivě byly jejich cytotoxické účinky srovnatelné jak u nádorových buněk závislých na oxidativní fosforylaci, tak u jejich protějšků využívajících převážně glykolýzu. V souladu s tím neodhalila rozdílnou citlivost ani chemická inhibice jednotlivých mitochondriálních komplexů, ani použití buněk Rho0 deficientních v mitochondriální DNA. Namísto toho všechny testované ionofory indukovaly agregaci a imobilizaci esenciálního kofaktoru p97, NPL4, čímž napodobovaly mechanismus dříve popsaný pro CuET. Důležité je, že dodatečná léčba netoxickým, účinnějším chelátorem dvojmocné mědi dibenzyldithiokarbamátem vedla k reverzi agregace NPL4 i cytotoxicity indukované ionofory. Souhrnně tato zjištění zpřesňují mechanistický rámec mědí podmíněného usmrcování buněk tím, že odhalují významnou proteotoxickou složku účinku dvojmocné mědi spojenou se zacílením NPL4. Tento poznatek posiluje racionální základ pro cílení na dráhy proteostázy regulované mědí jako potenciální protinádorovou strategii. (Abstrakt 5681. DOI: 10.1158/1538-7445.AM2026-5681)
NQO1 jako cíl pro překonání rezistence mnohočetného myelomu vůči léčbě
NAD(P)H:chinonoxidoreduktáza 1 (NQO1) je spojována se špatnou prognózou a rezistencí vůči léčbě u solidních nádorů, ale její role u mnohočetného myelomu (MM) není tak dobře definována. Studie mezinárodního týmu, jehož součástí byly i výzkumné skupiny z brněnského uzlu NÚVR, zkoumala její vliv na odpověď na léčbu a imunoterapeutické cíle u MM pomocí sekvenování RNA buněk CD138+ od 24 nově diagnostikovaných a 69 relabujících/refrakterních pacientů, spolu s buněčnými liniemi MM.
Exprese NQO1 byla významně vyšší u relabujícího/refrakterního MM než u nově diagnostikovaného onemocnění. V buněčných liniích MM zvýšila nadměrná exprese NQO1 rezistenci vůči inhibitorům proteazomu (IP) bortezomibu a karfilzomibu, zatímco citlivost k imunomodulátorům (IMiD) zůstala nedotčena. Farmakologická inhibice NQO1 pomocí ES936 obnovila citlivost k IP na úroveň buněk divokého typu.
Analýza povrchových antigenů neukázala žádné změny v BCMA, SLAMF7 nebo GPRC5D, ale exprese CD38 byla v buňkách s vysokou hladinou NQO1 významně snížena. V souladu s tím byly tyto buňky méně citlivé na protilátky proti CD38 daratumumab a isatuximab, zatímco ES936 obnovil expresi CD38 a léčebnou odpověď. Jelikož hladiny mRNA CD38 zůstaly nezměněny, mechanismus je pravděpodobně posttranslační.
Tyto nálezy identifikují NQO1 jako faktor rezistence jak vůči inhibitorům proteazomu, tak vůči terapiím zaměřeným na CD38 u MM a podporují inhibici NQO1 jako slibnou strategii u relabujícího nebo refrakterního onemocnění. (Abstrakt 3912. DOI: 10.1158/1538-7445.AM2026-3912)
Exprese GPRC5D na buňkách MM zesiluje působení talquetamabu
Receptor spřažený s G-proteinem, třída C, skupina 5, člen D (GPRC5D) je nově se prosazující imunoterapeutický cíl u mnohočetného myelomu (MM). Talquetamab, bispecifická protilátka cílená na GPRC5D, prokázal přibližně 70% účinnost u MM refrakterního vůči třem třídám léčiv, avšak často je pozorován relaps v důsledku genomové ztráty cílové struktury. Za účelem zkoumání interakcí mezi talquetamabem, ztrátou GPRC5D a T-lymfocyty v rámci imunitního mikroprostředí provedl mezinárodní tým autorů s účastí výzkumných skupin z brněnského uzlu NÚVR jednobuněčné sekvenování v kokulturách zdravých T-lymfocytů s modely MM s monoalelickým a bialelickým knockoutem GPRC5D vytvořenými pomocí CRISPR-Cas9, a to s talquetamabem i bez něj.
Metoda CITE-seq odhalila výrazné transkriptomické změny v buňkách MM jak při monoalelické, tak při bialelické ztrátě GPRC5D. Aktivované populace CD4 a CD8 T-lymfocytů, definované kanonickými aktivačními markery, byly detekovány pouze v přítomnosti talquetamabu a současně GPRC5D-pozitivních buněk MM; v kokulturách s modely bez GPRC5D přítomny nebyly. Napříč subpopulacemi T-lymfocytů vyvolával talquetamab v přítomnosti GPRC5D-pozitivních buněk MM výrazně zvýšenou expresi genů stimulovaných interferonem, včetně GBP2/4/5, IFI44, IFIT2 a ISG15. Pozoruhodné je, že samotný talquetamab zvyšoval expresi genů souvisejících s interferonovou signalizací, jako jsou STAT1 a IRF1, i bez přítomnosti GPRC5D-pozitivních buněk MM.
Další geny spojené s aktivací T-lymfocytů, včetně SOCS3, CD69, JUNB, BATF, CISH a PRDM1, byly upregulovány pouze tehdy, když byly současně přítomny talquetamab i GPRC5D, což ukazuje na odlišný aktivační stav.
Analýza obohacení genových sad (GSEA) prokázala obohacení signálních drah IFN-γ a IFN-α napříč více subpopulacemi T-lymfocytů, zatímco signální dráha IL2-STAT5 a dráhy zánětlivé odpovědi byly obohaceny pouze v přítomnosti talquetamabu i GPRC5D-pozitivních buněk mnohočetného myelomu (MM). V nepřítomnosti talquetamabu nebyl transkriptom T-lymfocytů ovlivněn samotným stavem GPRC5D.
Tato zjištění ukazují, že talquetamab indukuje v T-lymfocytech transkripční programy související s interferony i bez přítomnosti GPRC5D, avšak tato odpověď je zesílena, pokud buňky MM GPRC5D exprimují. Talquetamab rovněž přetváří aktivační stavy T-lymfocytů a distribuci jejich subpopulací v závislosti na stavu GPRC5D u buněk MM. (Abstrakt 5550. DOI: 10.1158/1538-7445.AM2026-5550)
Ekologická studie časových řad incidence karcinomu plic ve vztahu ke kontrole tabáku a harm reduction v ČR
Poslední z vybraných posterů pochází opět z olomouckého uzlu NÚVR a byl prezentován v sekci Late Breaking Abstracts. Karcinom plic zůstává hlavní příčinou mortality na nádorová onemocnění a je z velké části přičitatelný kouření tabáku. V České republice se v průběhu posledního desetiletí měnily politiky kontroly tabáku, kuřácké chování i užívání bezdýmných nikotinových alternativ. Tato ekologická studie časových řad analyzovala data Národního onkologického registru od ledna 2010 do prosince 2022, zahrnující 85 065 incidentních případů karcinomu plic u osob ve věku 15 let a více, s cílem posoudit trendy celkové incidence i incidence podle pohlaví, věku a histologického subtypu, včetně malobuněčného karcinomu plic (SCLC), nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC), adenokarcinomu (AC) a dlaždicobuněčného karcinomu (SQCC). Body změny trendu byly vybírány pomocí Bayesovského informačního kritéria a trendy po těchto bodech byly porovnávány s kontrafaktuálními projekcemi založenými na sklonu křivky před bodem zlomu.
Celková incidence zůstávala v zásadě stabilní, avšak tento obraz maskoval rozdílné trendy podle pohlaví: u mužů docházelo k trvalému poklesu, zatímco u žen k nárůstu. Výrazně klesala incidence SQCC, s bodem zlomu přibližně v březnu 2013, a SCLC klesal převážně u mužů, zatímco u žen, zejména starších, byla incidence SCLC stabilní nebo rostoucí. Nejvýraznější divergence mezi věkem a pohlavím byla pozorována u AC: incidence nadále rostla u starších žen, zatímco u mladších žen dosáhla vrcholu přibližně v červenci 2015 a následně oproti kontrafaktuálně očekávanému růstu klesala nebo se stabilizovala.
Pokles u mladších žen může věrohodně souviset s vyšším rozšířením a trvalejším užíváním bezdýmných nikotinových alternativ, což vede k nižší expozici karcinogenům vznikajícím při spalování tabáku, i když vzhledem k ekologickému designu studie jde zákonitě pouze o hypotézu generující další výzkum. Protože AC může vznikat jak cestami závislými na kouření, tak cestami na kouření nezávislými, a možnosti kauzální inference jsou na populační úrovni omezené, je zapotřebí delší sledování a propojení s údaji o individuální expozici. (Abstrakt LB375. DOI: 10.1158/1538-7445.AM2026-LB375)
